admin 一、cdna测序流程？
测序的流程如下。首先在dna的两端加上adapter。随后进行建库。建库之后用测序仪对index进行检测，从而得到cdna中序列信息。
二、cDNA的结构？
cDNA为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写，或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由依赖RNA的DNA聚合酶（反转录酶）的作用而合成，并且在合成单链cDNA后，在用碱处理除去与其对应的RNA以后，以单链cDNA为模板，由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA，在遗传工程方面广为应用。在这种情况下，mRNA的cDNA，与原来基因的DNA（基因组DNA，genomic DNA）不同而无内含子；相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上，与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。
三、cdna文库原理？
1. cdna文库是一种用于基因表达研究的工具，可以将细胞或组织中的mRNA转录成cDNA，然后将其克隆到载体中，构建成文库。2. cdna文库的原理是利用反转录酶将mRNA转录成cDNA，然后利用DNA聚合酶将cDNA扩增，再将其克隆到载体中，构建成文库。这样就可以得到一个包含细胞或组织中所有基因表达信息的文库。3. cdna文库的应用非常广泛，可以用于基因克隆、基因表达分析、蛋白质互作研究等领域。同时，随着高通量测序技术的发展，cdna文库也成为了RNA测序的重要工具之一。
四、cDNA由什么构建？
cDNA (complementary DNA) 是由反转录酶 (Reverse Transcriptase) 根据 mRNA (messenger RNA) 模板合成的 DNA 长链。cDNA 反映了 mRNA 上的信息，可以被用于基因表达分析、克隆、序列分析等多种应用。
构建 cDNA 的主要步骤包括：
1. 从细胞、组织或生物样品中提取总 RNA (Total RNA)；
2. 利用反转录酶将 mRNA 作为模板进行逆转录反应 (Reverse Transcription)，合成一条长链的 cDNA；
3. 通过PCR扩增产生多个 cDNA 拷贝 (copies)，以便后续的实验分析。
反转录酶可以使用多种来源，如细菌、逆转录病毒等。在反转录反应中，通常采用反义寡核苷酸引物 (Oligo dT) 作为启动子，促使反转录酶以 poly(A) 尾作为起始点合成 cDNA 长链。此外，反转录反应过程中可能需要添加脱氧核苷酸三磷酸 (dNTP)、缓冲液、酶切缓冲剂等试剂。
五、cdna文库的来源？
cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。
cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。
六、cdna反转录步骤？
cDNA反转录是一种将RNA转录为cDNA的技术，其步骤如下：
1. RNA提取：从细胞、组织或液体中提取RNA样品。
2. 反转录反应体系：将RNA样品与逆转录酶、随机引物（或Oligo（dT）引物）、dNTPs等反转录试剂混合。
3. 反转录反应：将反转录反应体系进行加热反应，通常反应温度为42-50℃，反应时间为30-60分钟。
4. 酶反应终止：将反应体系加热至95-98℃，用高温不可逆地使逆转录酶失活，终止反应。
5. 储存cDNA：将反转录反应产生的cDNA样品进行储存，以备后续实验使用。
需要注意的是，在反转录过程中应该控制好反转录的条件，例如反转录温度、反应时间、反转录试剂的质量等，以获得高质量的cDNA。
七、cdna用途有哪些？
cDNA 互补脱氧核糖核酸为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写，或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由依赖RNA的DNA聚合酶（反转录酶）的作用而合成，并且在合成单链cDNA后，在用碱处理除去与其对应的RNA以后，以单链cDNA为模板，由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA，在遗传工程方面广为应用。在这种情况下，mRNA的cDNA，与原来基因的DNA（基因组DNA，genomic DNA）不同而无内含子；相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上，与exon序列、先导序列以及续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。
八、cdna与dna区别？
DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
九、cdna的浓度和纯度？
rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求：浓度20ng/ul以上足够了，如果用的是组织提取，浓度一般很高，可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞，浓度低一些也没有关系。
纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上，260/230值1.2以上基本合格。
RT-PCR：最重要的是RNA是否有明显降解，这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮1.5-2.0倍，说明提取得不错。
反转录·聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录（reverse transcription ）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆 特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。
提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达
十、cdna是目的基因吗？
目的基因可以在c dna中找到。
目的是指可以编码蛋白质的基因，也可以是一些调控因子。C dna文库是部分基因文库。是通过信使rna反转录得到的DNA而构建的。基因文库当中含有的基因种类不全。并且基因的结构中没有非编码区以及编码区当中的内含子。
