达优高科 一、分子生物学检验必背？
1、简述双抗体夹心法（ELISA）原理定义、操作过程、注意事项。
（1）原理定义：将可溶性的抗原或抗体吸附到固相载体上，并保持其免疫活性，使之结合并吸附结合抗体或抗原，通过洗涤去除未结合成分，再与酶标记的抗体或抗原结合，并保留酶的活性，然后加入酶反应的底物，后者被催化变为有色产物，根据反应颜色的深浅进行免疫反应的定性和定量的方法。
（2）操作过程：
①用一直抗体包被固相载体；
②加入受检的标本（含待测抗原），使抗原与固相上的抗体结合；
③加入以辣根过氧化物酶标记的已知抗体，使之与抗原结合。标记的酶可催化底物（四甲基联苯胺）起显色反应，从而指示特异性抗原抗体反应的存在。
（3）注意事项：
①对倍稀释抗原混匀时不要产生太多气泡；
②酶标板要洗涤干净不要交叉污染；
③加样时从最低稀释度逐一加至最高稀释度。
2、比较聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳。
（1）相同点：都是电泳方法 ，可用于物质的分离与鉴定。
（2）不同点：前者利用蛋白质分子大小形状的差异进行分离，后者利用的是两性电解质形成的光滑pH使蛋白质停留在与其pI相等的位置上进行分离；前者有扩散的作用，后者无扩散作用，因而物质更集中，分辨率高；电泳时间加长，前者电泳效果会变差，后者可使同一蛋白区带更狭窄，利于分辨。
3、比较向聚丙烯酰胺薄膜层析和凝胶柱层析。
（1）相同点：都是层析方法，可用于分离物质；固定相均为固体，流动相均为液体；与分离物质不发生反应，分离后可鉴定。
（2）不同点：前者属于特殊的吸附分配层析，后者属于分子筛层析；前者通过荧光观察判断分离物质，后者通过收集液的显色反应；前者原理与分离物质与聚丙烯酰胺薄膜形成氢键有关，后者利用分子颗粒大小有关。
4、使牛蛙红细胞细胞融合的试剂及其原理；红细胞计数。
（1）PEG；PEG具有强烈的吸水和凝聚沉淀蛋白质的作用，可改变细胞膜的结构，使两细胞接触点处脂类分子发生分散和重组，引起细胞融合。
（2）计数：格子数；稀释倍数。
5、两种核酸提取的基本要求和鉴定方法。
（1）DNA
基本要求：保持DNA大分子的完整性及纯度；避免机械张力剪切，操作轻柔；注意对杂质蛋白和RNA的去除；防止DNA酶对DNA的降解。
鉴定方法：A260/A280比值在1.8左右；琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭荧光显色，观察条带。
（2）RNA
基本要求：全程要防止RNA酶污染，对实验器具要预先处理，可加入特异性RNA酶抑制剂，实验中要佩戴一次性口罩手套。
鉴定方法：A260/A280比值在2.0左右；琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭荧光显色，观察28S亮度是否为18S两倍。
6、PCR的原理以及反应体系中各组分的作用。
（1）PCR原理：
该技术是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的情况下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段DNA片段来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3’-OH末端，并以此为起点，沿模板5’→3’方向延伸，合成一条新的DNA互补链。而新合成的链又可作为下一轮反应的模板，如此循环往复，每循环一次，DNA分子数即按指数倍增（2n）。
（2）反应体系中各物质作用：
①模板DNA：DNA复制模板；
②引物：开始阶段结合到DNA模板的一段互补序列部位，启动DNA双链的合成；
③4种脱氧核苷酸：合成DNA原料；
④耐热的DNA聚合酶：催化DNA链合成；
⑤适宜的缓冲液：维持合适pH，以保持酶的活性并帮助DNA解除缠绕结构。
7、小鼠脾单个核细胞的分离，离心后从上到下都是什么成份；分离的原理；淋巴细胞浓度的计算。
（1）从上到下分别是：稀释的血浆；单个核细胞；粒细胞；红细胞。
（2）原理：本次实验根据颗粒沉降原理，将不同密度的小鼠脾脏细胞置于淋巴细胞分离液上进行水平式离心，使单个核细胞在其沉降运动中位于分离液洁面上；达到分离小鼠脾单个核细胞的目的。已知小鼠淋巴细胞和单核细胞的密度约为1.088，而红细胞与粒细胞的密度均大于1.088。因此，用密度为1.088±0.001的淋巴细胞分离液通过密度梯度离心方法，可从小鼠脾脏细胞分离得到单个核细胞。
（3）计数：格子数；稀释倍数。
8、简述对流免疫电泳原理。
对流免疫电泳是电泳技术与双向琼脂扩散技术相融合而形成的一种定向加速的凝胶内免疫沉淀反应。与双向琼脂扩散技术中抗原与抗体分别向四周自由扩散不同，对流免疫电泳在凝胶中加一直流电场，抗原和抗体受到电泳和电渗两种力量的综合作用而向某一方向定向加速移动，因此可以提高灵敏度，明显缩短反应时间。
9、写出2种蛋白质定量方法，并择一详述。
（1）标准曲线法；标准管法。
（2）标准曲线法：双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色络合物，此反应即为双缩脲反应。含有两个或两个以上肽键的化合物都具有双缩脲反应。蛋白质含有多个肽键，在碱性溶液中能与铜离子络合成紫红色化合物。其颜色深浅与蛋白质的浓度成正比，可以用比色法进行鉴定。
10、简述等电聚焦电泳中Ampholine& AP & TEMED、聚酰胺薄膜、秋水仙素、细胞融合中PEG、DNA纯化中EDTA & SDS、CDC实验中石蜡油 & 抗淋巴血清 & 细胞培养液 & 补体 & 锥蓝的作用。
（1）Ampholine：在直流电场作用下，能从正极到负极形成一个pH逐渐升高的平滑连续而且稳定的pH梯度，从而在电泳中实现等电点不同的物质的分离；
AP：引发凝胶的聚合；
TEMED：加速凝胶的聚合。
（2）聚酰胺薄膜：由于分离物质和展层剂的不同，其与聚酰胺薄膜上的酰胺基团竞争形成氢键的能力也不同，从而可以利用其泳动速度差异，实现不同种物质的分离。
（3）秋水仙素：抑制纺锤体形成，使细胞周期停留在中期，便于观察。
KCl低渗溶液：使得细胞膨胀，利于中期染色体的观察。
（4）PEG：具有强烈的吸水和凝聚沉淀蛋白质的作用，可改变细胞膜的结构，使两细胞接触点处脂类分子发生分散和重组，引起细胞融合。
（5）EDTA：络合二价金属离子，当Mg2+被络合后，细胞内释放出来的DNA酶被抑制，避免DNA的降解，同时金属离子络合后，细胞膜稳定性下降，有利于膜的裂解；
SDS：使蛋白质变性，能破坏膜蛋白的构象，使膜裂解，又能使核蛋白中的核酸与蛋白质解离，并且SDS也具有抑制DNA酶的作用。
（6）石蜡油：密封细胞反应板，防止污染，利于孵育；
抗淋巴血清：作为抗体提供补体结合位点与补体结合，使其活化形成MAC；
细胞培养液：作为抗体的阴性对照；
补体：与抗体的补体结合位点结合，活化形成MAC，检测是否有特异性抗原；
锥蓝：使死细胞着色，通过光学显微镜观察，可以测得死细胞百分率。
二、分子生物学检验的优点？
分子生物学的技术成果已经显示出了其强大的优势。例如工模拟酶，并生成新的催化剂,领导了化学工业的新革命。
除此之外，分子生物学技术不仅可以应用到化学方面，还可以应用于饲料的微生物检测，在很大程度上能够保证饲料安全和人类健康。
三、听歌识曲与模式识别的区别
听歌识曲与模式识别的区别
在当今数字时代，随着技术的不断发展，人工智能领域也日益引人关注。听歌识曲和模式识别是人工智能领域中两个重要的技术应用。虽然这两者都涉及到对音频数据的处理和分析，但它们之间存在着一些关键的区别。
什么是听歌识曲？
听歌识曲是一种通过分析声音特征来识别音乐曲目的技术。这种技术可以让用户通过录音或者麦克风输入的声音，自动识别出对应的歌曲名称和艺术家信息。听歌识曲的应用包括音乐识别软件和音乐APP。
什么是模式识别？
模式识别是一种更广泛的技术范畴，涉及识别数据中存在的模式、规律或特征。在音频领域，模式识别可以用于识别音乐风格、情绪色彩、甚至是音乐家的个人风格等方面。
听歌识曲和模式识别的区别
虽然听歌识曲和模式识别都属于音频数据处理领域，但它们的目标和应用有所不同。
- 听歌识曲更注重于识别具体的音乐曲目，帮助用户轻松找到自己喜爱的歌曲。
- 模式识别则更加广泛，旨在探索音频数据背后的智能规律，比如音乐风格、情绪倾向等。
此外，听歌识曲通常需要依托大量的音乐数据库和算法模型，以便实现准确的识别和匹配；而模式识别则更注重对数据进行深度分析和学习，以揭示数据背后的潜在规律。
未来发展趋势
随着人工智能技术的不断进步和应用场景的拓展，听歌识曲和模式识别的发展也将呈现新的趋势。
听歌识曲方面，随着音乐版权和流媒体服务的普及，听歌识曲将更加重要和便利，用户可以通过简单的录音或者输入，即可快速找到自己喜欢的音乐。
模式识别方面，随着深度学习等技术的发展，模式识别将能够更准确地识别音乐的细微特征，为音乐创作和研究提供更多可能性。
总的来说，听歌识曲和模式识别在音频处理领域都具有重要的意义，它们的区别和联系构成了人工智能技术在音乐领域的丰富多彩。未来，随着技术的进步和应用场景的不断拓展，听歌识曲和模式识别必将迎来更加美好的发展前景。
四、分子生物学检验方法的缺点？
相比于免疫学检测，分子生物学检测灵敏度和特异性均显著提高，缺点是耗时较长，对实验设备及检测人员能力要求较高。
五、系统辩识和模式识别的区别
在计算机科学和人工智能领域，经常会提到系统辨识和模式识别这两个概念。虽然它们在表面上可能有一些相似之处，但实际上在理论和应用上存在明显的区别。
系统辩识
系统辩识是指通过对系统的输入输出数据进行分析和模型构建，来推断系统的内部结构和特性的过程。它通常涉及建立数学模型以描述系统的动态行为，并通过参数估计和模型验证来优化模型的准确性。
系统辩识的主要目的是了解系统的行为模式、控制系统或预测系统未来的行为。在控制工程、信号处理和物理建模等领域，系统辨识通常被用来优化系统性能、定位故障或提高系统稳定性。
模式识别
模式识别是一种机器学习技术，旨在自动识别数据中的模式和规律。通过对数据进行特征提取和分类，模式识别算法可以自动识别数据中的类别、趋势和关联性。
模式识别广泛应用于图像识别、语音识别、生物信息学等领域。它的主要目的是从数据中学习规律并进行分类或预测，而不是了解系统内部结构或行为。
区别与联系
系统辨识和模式识别之间的主要区别在于，系统辨识侧重于建立系统的模型和理解系统的内部机制，而模式识别侧重于从数据中学习规律并进行分类或预测。而联系在于，两者都是利用数据和数学模型进行分析和推断，以实现对系统或数据的理解和应用。
在实际应用中，系统辨识和模式识别通常结合使用，以实现更准确的数据分析和预测。例如，在工业生产中，可以通过系统辨识来优化生产过程并建立系统模型，然后利用模式识别来监测设备状态和预测故障。这种综合运用可以提高系统的效率和可靠性。
结论
系统辨识和模式识别在计算机科学和人工智能领域都扮演着重要角色，它们各自有着独特的应用和优势。理解系统辨识和模式识别的区别和联系，有助于我们更好地利用这些技术来解决现实世界中的复杂问题。
六、掌纹识别的误识率为？
在面相学精通的前提下，误识率不超过13%
七、分子生物学检验技术发展史？
分子生物学的历史开始于1930年代，统合了当时多种学门，包括生物化学、遗传学、微生物学与病毒学，目的是要从更基本的层次来理解生命现象。
1940年，乔治·毕多与爱德华·塔特姆证明了基因与蛋白质之间的关系，因此而联系了生物化学与遗传学。
到了1961年，方斯华·贾克柏与贾克·莫诺，提出了一个学说，认为DNA与蛋白质之间具有一种称为mRNA的中介物。
八、初级检验师会考分子生物学吗？
初级检验技师考试内容：临床检验基础、临床血液学检验、临床化学、临床免疫学和免疫检验、微生物学检验、寄生虫学及检验、医疗机构从业人员行为规范与医学伦理学，不考分子生物学。
九、分子生物学检验技术的任务与应用？
分子生物学检验技术是以核酸或者是蛋白质为分析材料通过分析基因的结构，表达的变化和由此而导致的基因功能的改变，为疾病的研究和诊断提供更准确的，更科学的信息和依据，主要用于感染性微生物的检测，基因突变的检测，法医学检测等等检测工作领域里面。
十、分子生物学与检验技术知识目标？
分子生物学检验技术：是以核酸或蛋白质为分析材料，通过分析基因的结构、表达的变化和由此而导致的基因功能的改变，为疾病的研究和诊断提供更准确、更科学的信息和依据的一门学科。
